腸道病毒感染可出現(xiàn)多種癥狀，其中有腸道脹氣等炎癥后表征。本模型首次報道了大鼠H1PV感染后的腸道炎癥損傷，以及脹氣等臨床癥狀，并將其與腸道菌群的改變做關(guān)聯(lián)分析。本模型是研究腸道病毒感染及損傷機制研究的模型。

H1PV為低于人間傳染病名錄三級安全風(fēng)險的病原，人類感染風(fēng)險低。

H1PV是大鼠必須排除的病原體，對動物有致病性。會干擾其他實驗研究。

鑒于此，此感染實驗必須在BSL-2級以上的生物安全實驗室進行病原學(xué)實驗，在ABSL-2實驗室進行動物實驗。

1、 鑒定、病原學(xué)檢查信息

使用PCR方法進行組織病毒評價。病毒在腸道的病毒擴增呈現(xiàn)一過性。此模型的感染后長期的炎癥損傷與免疫應(yīng)答相關(guān)。

測試需和組織內(nèi)參基因表達做均一化處理，如使用GAPDH做內(nèi)參。

2、 表型分析

感染動物感染后明顯臨床表現(xiàn)。

3、 病理表型

大體病理可見感染動物出現(xiàn)腸道脹氣。

組織病理可見回腸絨毛水腫，充血，炎細(xì)胞浸潤。

回腸粘膜絨毛上皮細(xì)胞壞死，固有層血管擴張充血，炎細(xì)胞浸潤。

實驗材料

實驗動物為SPF級Wistar大鼠，感染癥狀等與性別無明顯關(guān)系，感染優(yōu)選5周齡雄性大鼠。

實驗使用毒株為ATCC來源H-1毒株（VR-356）。

實驗環(huán)境

ABSL－２實驗室，

使用負(fù)壓IVC飼養(yǎng)動物。

使用AII型生物安全柜更換動物墊料，并進行感染等操作。

實驗操作規(guī)程：

病毒擴增：在BSL-2實驗室進行病毒擴增，并使用TCID50法測定病毒滴度。

使用100 TCID50／只動物進行灌胃感染。

監(jiān)測動物臨床表征變化。

動物處理倫理：

動物感染實驗，動物的痛苦不可避免，應(yīng)按照倫理審查確定研究的科學(xué)性，并根據(jù)研究需要減少動物的使用。

一、疾病概述

胃腸脹氣是一種人類常見的癥狀，其誘發(fā)原因多樣。消化道傳播的病毒可導(dǎo)致病毒性腸炎，會導(dǎo)致造成胃腸蠕動功能下降，容易產(chǎn)生胃腸脹氣，而且腸道內(nèi)微環(huán)境變化可導(dǎo)致菌群失調(diào)，進而出現(xiàn)脹氣等癥狀。

二、模型背景

1、H1細(xì)小病毒信息

大鼠H1細(xì)小病毒（H1 parvovirus ，H1PV)是大鼠的自身感染的病原體，大鼠感染后多無明顯臨床表現(xiàn)，但可存在腸道炎癥反應(yīng)。

2、實驗動物背景信息

各品系大鼠對H1PV感染后多無癥狀。文獻報道和我們自己的研究表明，Wistar近交品系的大鼠在新生期可出現(xiàn)典型的感染癥狀，成年動物感染后可出現(xiàn)消化道炎癥。

3、研究背景

大鼠H1PV是一類大鼠的高流行病原，成年動物多不致病，但對幼齡大鼠有影響，干擾其發(fā)育，實驗感染可致死。同屬的KRV株病毒報道可至成年動物出現(xiàn)脹氣癥狀。

參考文獻：

Liang CT, Shih A, Chang YH et al. Microbial contaminations oflaboratory mice and rats in Taiwan from 2004 to 2007. J Am Assoc Lab Anim2009;48:381–6

Mahler M, Kohl W. A serological survey to evaluate contemporaryprevalence of viral agents and Mycoplasma pulmonis in laboratory mice and ratsin western Europe. Lab Anim 2009; 38: 161–5

Taylor K, Copley CG. Diagnosis of Kilham rat virus using PCR. LabAnim 1994;28:26–30.